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本文主要介紹穩定轉染的原理、步驟,穩定轉染能夠得到穩定高表達的細胞株,是滿足活性蛋白大量制備的方法。利用哺乳動物系統生產蛋白的方式有兩種:瞬時轉染和穩定轉染。使用哺乳動物細胞表達蛋白,細胞的選擇培養也不可忽視。常用的有中國倉鼠卵巢細胞(CHO)和人胚腎細胞(HEK293)。德泰生物主要培養HEK293用于哺乳動物細胞瞬時轉染,CHO細胞用于穩定轉染。穩定轉染通過穩定細胞系構建篩選出能夠穩定表達的細胞株。針對瞬時轉染,外源基因在短時間轉錄翻譯得到的蛋白量少,1mg質粒得到1mg...
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真核蛋白表達細胞轉染方式有兩種:瞬時轉染和穩定轉染,本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細胞轉染一般步驟,影響轉染效率的因素,幫助我們提高實驗的成功率。在哺乳動物細胞蛋白表達實驗,根據不同的實驗目的,將質粒導入細胞有兩種方法:瞬時轉染和穩定轉染。細胞轉染是將外源基因導入真核細胞的過程。質粒、DNA、RNA將這些外源基因導入到真核細胞內并不容易,要跨越細胞膜的屏障進入細胞質。瞬時轉染瞬時轉染是指外源基因導入到細胞后得以表達,但是基因不整合到細胞的基因組上,因此不會隨著細胞的生長...
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美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,美國R&DSystems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應。美國R&DSystems試劑盒性能的重要性:①靈敏度:反映的是試劑盒檢出被檢物質的低量的能力,用戶可根據自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢...
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R&DSystems擁有近30,000種產品,95%以上由自己研發生產。其產品包括細胞因子、ELISA試劑盒、生長因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex液相芯片、多因子檢測固相芯片、流式細胞分析與細胞篩選、干細胞及細胞培養等;覆蓋腫瘤、發育、糖生物、內分泌、免疫、神經學、蛋白酶、信號傳導等學科研究領域;且每年有近2,000種新產品不斷問世,以滿足不同科研工作者的研究需要。美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表...
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